Automatyczny fluorescencyjny analizator komórek typ Countstar MYRA FL do zliczania w jasnym polu (pow. 5.0, 6.6, 8.0x) i fluorescencji (wzbudzenie 465-485nm, emisja 535nm, LP600, pow. 5x)

Fluorescencyjny analizator MIRA FL integruje inteligentny algorytm i adoptuje opatentowaną technologię stałego ogniskowania oraz zoomu optycznego, aby zrealizować identyfikację cech komórek. Dzięki metodom barwienia błękitem trypanu i AO/PI pomaga uzyskać dokładne wyniki zliczania wszystkich typów komórek i wspiera eksperymenty z transfekcją GFP/RFP. Przyrząd jest łatwy w obsłudze, wydajny w testowaniu, oszczędza cenny czas badań naukowych i pomaga personelowi laboratoriów naukowych w uzyskiwaniu szybkich i wydajnych wyników analizy komórek.

Zalety:

• Kolorowy graficzny ekran dotykowy 8’’ umożliwiający szczegółową obserwację komórek
• Oprogramowanie na intuicyjnych aplikacjach BioApp działające w systemie Android
• Wewnętrzna pamięć 128 GB umożliwiająca zapamiętanie 50.000 pomiarów
• Wysokiej rozdzielczości kamera CMOS 5 MP, potrójny zoom optyczny 5.0x, 6.6x, 8.0x, technologia Fixed Focus zapewniają precyzyjne rezultaty i znakomity obraz komórek wielkości 1-180 µm
• Zastosowanie do wielu aplikacji: analiza gęstości i żywotności komórek barwionych AO/PI, badania wydajności transfekcji GFP/RFP, klasyczne zliczanie komórek barwionych błękitem trypanu
• Standardowe 5-pozycyjne płytki pomiarowe zapewniające najwyższą wydajność na rynku
• Niewielkie gabaryty 220x285x240mm

BioApps

Układ graficznego interfejsu użytkownika (GUI) opartego na systemie Android zapewnia prostą i wydajną obsługę. Można dodawać i modyfikować wiele gotowych i konfigurowalnych BioApps (szablonów testów), dopasowanych do różnych typów komórek, aby spełnić obecne i przyszłe cele badawcze. Korzystanie z BioApp wymaga prostego kliknięcia żądanej BioApp, nazwania próbki, wybrania rozcieńczenia i przeprowadzenia testu, dzięki czemu analiza jest prosta i wygodna.

Projekt graficznego interfejsu użytkownika usprawnia każdy eksperyment i zapewnia natychmiastowy dostęp do uzyskanych obrazów o wysokiej rozdzielczości i wyników.

Algorytmy analizy obrazu

Aby analizować i klasyfikować ogromną zmienność wyglądu komórki na obrazach, Countstar® Mira FL wykorzystuje zaawansowane algorytmy analizy obrazu oparte na sztucznej inteligencji (AI). Te samouczące się narzędzia są w stanie przeanalizować nawet złożone sytuacje związane z obrazem pozyskanym przez Countstar® Mira FL. Implementacja algorytmów analizy kształtu komórek pozwala na bardzo precyzyjną i powtarzalną analizę stanu cyklu komórkowego. Ponadto dane można wykorzystać do interpretacji korelacji między stanem komórek a tworzeniem się skupisk komórek (agregatów, małe sferoidy) w zależności od warunków środowiskowych.

Wraz z gęstością i żywotnością komórek analizowany jest również rozkład średnicy komórek, współczynnik kształtu komórek i tworzenie się skupisk komórek (agregatów). Względna intensywność fluorescencji dostarcza danych o zawartości markerów lub produktów oznakowanych fluorescencyjnie. Funkcja krzywej wzrostu umożliwia natychmiastową informację zwrotną na temat kinetyki trwającego procesu biologicznego. Pojedyncze komórki można klasyfikować nawet wewnątrz agregatów. Zmiany współczynnika kształtu komórki mogą być ważnym, wczesnym wskaźnikiem zmian w hodowli komórkowej. Dane dostarczane przez Countstar® Mira FL umożliwiają użytkownikom lepszą interpretację w celu optymalizacji dynamiki procesów hodowli komórkowej z komórkami ssaków, alg i drożdży.

Komórki CHO barwione AO/PI; obraz w jasnym polu, z etykietami żywotności.                                            Ta sama próbka CHO jak obok; Widok fluorescencji:

           Zielony: wykryte komórki glonów                                                                                                                                        Zielone wskaźniki: żywe komórki

           Niebieski: niespecyficzne obiekty                                                                                                                                        Czerwony: martwe komórki

            Różowy: zagregowane komórki                                                                                                                                           Różowy: zagregowane komórki

3-warstwowy zoom optyczny

Nasza innowacyjna technologia 3-warstwowego zoomu optycznego (5.0x, 6.6x i 8.0x ) umożliwia operatorowi identyfikację obiektów w zakresie wielkości od 1 μm do 180 μm. Po prostu wybierz jedną z preinstalowanych BioApps dla danej klasy obiektów. Wysoka rozdzielczość obrazów pozwala na dogłębne spojrzenie wewnątrz monitorowanych komórek.

                           Od lewej do prawej: specyfikacja chlorelli. w jasnym polu (algi zielone; 3-8 μm); Powiększenie 5.0x, 6.6x i 8.0x

Prezentacja wyników, przechowywanie wyników i eksport

Intuicyjny graficzny interfejs użytkownika Countstar® Mira FL został zaprojektowany, aby usprawnić codzienne wyzwania związane z przepływem pracy w laboratorium. Konfigurowalne szablony protokołów testów można dostosować do różnych cech każdej linii komórkowej. Interfejs użytkownika pozwala na szybki dostęp do już pozyskanych obrazów i wyników zapisanych w wewnętrznej bazie danych. Kilkoma kliknięciami można posegregować wyniki w bibliotece danych Assay (BioApp) według daty i godziny oraz wybrać żądany eksperyment. Wewnętrzna pamięć o pojemności 128 GB umożliwia operatorowi przechowywanie do 50.000 testów. Eksport obrazów, raportów pdf i plików csv można wykonać w kilku prostych krokach.

           Menu danych: przegląd wyników, pojedyncza analiza                                                        Histogram rozkładu wielkości hodowli CHO, wybarwiony AO/PI

            Krzywa wzrostu, porównująca ze sobą dwie hodowle                                                        Menu główne pokazujące zainstalowane BioApps

Szybka obsługa

Menu przygotowania eksperymentu: wybierz jeden lub więcej komór płytki pomiarowej, wprowadź odpowiedni identyfikator próbki, zdefiniuj zastosowane rozcieńczenie i kliknij Start - analiza zakończona w mniej niż 20 sekund!

Biblioteka zarządzania materiałami eksploatacyjnymi umożliwia szybki wybór odpowiedniego nośnika próbek dla BioApp. Do tej biblioteki można dodawać nowe materiały eksploatacyjne o innej geometrii i ich wartości warstwy ogniskowania.

Gotowe protokoły eksperymentów w bibliotece BioApp nie wymagają żadnej interakcji użytkownika podczas analizy. Można kolejno analizować do pięciu komór. Można uzyskać do trzech interesujących obszarów w pojedynczej komorze płytki pomiarowej, aby zoptymalizować dokładność i precyzję testów.

Wszechstronne aplikacje BioApps do różnych typów komórek

Jedną z unikalnych cech Countstar® Mira FL są fabrycznie zainstalowane BioApps. Pozwalają one wykonywać szeroki zakres eksperymentów na różnych organizmach i dostarczają wiele danych, aby pomóc określić status hodowli komórkowej. BioApps są indywidualnie projektowane do danej charakterystyki komórki. Ich konfigurację można dostosowywać, kopiować i eksportować do innych urządzeń Countstar®. Wszechstronność licznika Mira FL pozwala na uzyskanie wyników hodowli komórkowej w ciągu kilku sekund. Wystarczy kliknąć BioApp, nazwać próbkę, a system dostarczy wyniki w ciągu kilku sekund! Duża liczba już zainstalowanych BioApps pozwala w każdej chwili rozszerzyć nasze możliwości badawcze. Skorzystaj z naszego wieloletniego doświadczenia w projektowaniu i dostosowywaniu BioApps specjalnie do różnych cech tysięcy typów komórek.

BioApp do oznaczania gęstości i żywotności komórek barwionych mieszaniną AO/PI

Do MiRA FL zalecamy mieszaninę barwników fluorescencyjnych AO/PI. Zainstalowana aplikacja AO/PI BioApp do oznaczania gęstości komórek i żywotności kultur komórek eukariotycznych opiera się na zasadzie, że oba barwniki, oranż akrydynowy (AO) i jodek propidyny (PI), będą interkalować między kwasami nukleinowymi chromosomów wewnątrz jądra. AO przeniknie nienaruszoną błonę jądra w dowolnym momencie, aby zabarwić DNA, emitując zielone światło o długości maks. 525 nm, jeśli zostanie wzbudzone przy 480 nm. PI jest w stanie przejść tylko przez rozpadającą się błonę jądra umierającej (martwej) komórki. Ten barwnik będzie emitował światło czerwone o amplitudzie 615 nm, jeśli PI zostanie wzbudzone przy 525 nm. Zestaw do barwienia AO/PI wykorzystuje zjawisko fizykochemiczne efektu FRET (Transfer energii rezonansu Foerstera). Jeśli próbki komórek zostaną wzbudzone przy długości fali 480 nm, to światło emitowane przez barwnik AO obecny w jądrze przy długości fali 525 nm zostanie całkowicie pochłonięte przez barwnik PI nagromadzony w jądrach martwych  komórek, które następnie emitują w wyniku wzbudzenia czerwone światło przy 615 nm. Transfer energii gwarantuje, że nie wystąpi podwójna emisja światła ani prześwietlenie. Dodatkowo zapewnia również, że zostaną wybarwione tylko komórki zawierające jądra i nie zostaną uwzględnione żadne akarionty, takie jak erytrocyty.

                       Wysoka porównywalność żywotności różnych próbek komórek,                                                                                                                                                               Seria rozcieńczeń próbki komórek HEK293, pokazująca               

                                            testowana w Countstar® Mira FL                                                                                                                                                                                                           wysoką dokładność wyników Mira FL

                                     i cytometrze przepływowym (B/C CytoFLEX)

                  Ekran widoku wyników próbki hodowli komórkowej CHO, barwionej AO/PI,                                                                                    Ta sama próbka pokazująca znakowanie fluorescencyjne daje powiększony widok – zielone kółka identyfikują żywe 

     przedstawiający obrazy w jasnym polu z dezaktywowanym znakowaniem. (powiększenie 5,0x)                                                                                               komórki, czerwone kółka identyfikują martwe lub umierające komórki

BioApp wydajność transfekcji GFP/RFP

Używanie zielonych lub czerwonych białek fluorescencyjnych (GFP/RFP) do wiązania ich kowalencyjnie jako znaczników z białkiem będącym przedmiotem zainteresowania jest powszechnie znaną techniką sprawdzania wydajności transfekcji genów opartych na wektorach wirusowych lub plazmidowych. GFP/RFP to niezawodne narzędzia do ilościowego określania optymalizacji procesu produkcji białek, a także szybka i bardzo precyzyjna metoda określania wydajności białka w wielu procesach produkcji API regu

lowanych przez cGMP. Ta technologia znakowania stała się również ważnym narzędziem w różnych podejściach do terapii genowej do kontrolowania wydajności transfekcji modyfikacji genetycznych.

W porównaniu do cytometrii przepływowej, Countstar® Mira FL nie tylko dostarcza porównywalnych wyników, ale dodatkowo dostarcza obrazy potwierdzające zawartość kwestionowanych komórek. Wszystkie obrazy i dane są trwale przechowywane co zapewnia wysoki poziom identyfikowalności w dowolnym momencie. Ponadto analiza obrazowa jest znacznie szybsza i wymaga tylko 20 μl próbki cieczy.

Wyniki analizy, w tym wybór obrazu w widoku fluorescencyjnym komórek HEK293, transfekowanych GFP

Wykresy pików próbek 1+4 (patrz obok), przedstawiające komórki HEK 293 wykazujące ekspresję GFP,                                                 Dane testowe wszystkich 4 próbek pokazują doskonały poziom korelacja między dwoma urządzeniami

testowane w B/C CytoFLEx, pokazujące 27,8% i 95,9% współczynnika wydajności transfekcji.                                                                                                                

   BioApp błękit trypanu

Metoda barwienia błękitem trypanu jest powszechnie stosowana w wielu laboratoriach do monitorowania stanu hodowli komórkowej i jest złotym standardem w oznaczaniu stężenia i żywotności. Błękit trypanu przeniknie przez rozpadające się struktury błony zewnętrznej umierających komórek zwierzęcych i zabarwi cytoplazmę na niebiesko. Żywe komórki zablokują barwnik przed penetracją ich błon i nadal będą jasne pod mikroskopem. 

Ten optyczny wygląd żywych i martwych komórek można precyzyjnie rozróżnić za pomocą algorytmów analizy obrazu opartych na sztucznej inteligencji w Countstar® Mira FL. Poza liczbą komórek martwych i żywych komórek, analiza obrazu naszego analizatora dostarcza dodatkowych danych, jak: średnice komórek, tworzenie agregatów i morfologię komórek.

Wartość regresji liniowej całkowitej gęstości komórek świadczy o wysokiej                                                   Wyniki testu Mira FL wykazują większą spójność  w porównaniu do ręcznego zliczania w hemocytometrze. 

      dokładności i precyzji technologii Countstar® Mira FL                                                             Niedoszacowania w analizie ręcznej są typowe ze względu na niższą statystyczną wielkość bazową.         

Dane techniczne:

Zakres średnicy pojedynczych komórek: 1-180 µm

Max średnica wykrywanych organoidów: ≤800 µm

Całkowity zakres koncentracji: 1x104 – 3x107 komórek/mL

Optymalny zakres koncentracji (cv<5%):

               5x105 – 1x107 komórek/mL (powiększenie 5.0x)

               1x106 – 2x107 komórek/mL (powiększenie 6.6x)

               1x106 – 3x107 komórek/mL (powiększenie 8.0x)

Zoom optyczny w jasnym polu: 5.0x, 6.6x, 8.0x

Zoom optyczny w fluorescencji: 5.0x

Kanały fluorescencji: Ex 465-485 nm, Em 535/40nm, LP600nm

Kamera kolorowa CMOS 5 MP

2x USB 2.0, pamięć wewnętrzna 128 GB (50.000 testów)

Zasilanie 100-240V, 50/60Hz

Ekran 8’’ dostosowany do pracy w rękawiczkach

Rozdzielczość ekranu 1280x800 (HD)

Wymiary: 240x220x285 mm, waga: 4.0 kg

Do aplikacji nie wymagających fluorescencji oferujemy model COUNTSTAR MIRA BL