Automatyczny analizator komórek typ Countstar MYRA BF do zliczania w jasnym polu (pow. 5.0, 6.6, 8.0x)

Specyfikacja

Analizator MIRA BL z 3-warstwowym zoomem optycznym (5.0x, 6.6x i 8.0x) i kamerą CMOS 5 MP, oprócz analizy liczby i żywotności komórek przy użyciu klasycznego barwienia kultur komórkowych błękitem trypanowym, jest w stanie wykonać również nie inwazyjną, powtarzalną analizę konfluencji i organoidów w różnych naczyniach do hodowli komórek :

- mini kolby hodowlane typu T (25 mL),

- szalki Petriego o różnych średnicach (35 do 90 mm),

- µ-płytki 8-komorowe,

- hemocytometry Neubauer, Thoma, Fuchs-Rosenthal.

Zalety:

· Kolorowy graficzny ekran dotykowy 8’’ umożliwiający szczegółową obserwację komórek

· Oprogramowanie na intuicyjnych aplikacjach BioApp działające w systemie Android

· Wewnętrzna pamięć 128 GB umożliwiająca zapamiętanie 50.000 pomiarów

· Możliwość analizy komórek w różnych naczyniach, płytkach pomiarowych i hemocytometrach

· Wysokiej rozdzielczości kamera CMOS 5 MP, potrójny zoom optyczny 5.0x, 6.6x, 8.0x, technologia Fixed Focus zapewniają precyzyjne rezultaty i znakomity obraz komórek wielkości 2-180 µm

· Zastosowanie do wielu aplikacji: precyzyjne zliczanie komórek, w tym komórek glonów, drożdży, analizę gęstości i żywotności komórek barwionych błękitem trypanu, badanie konfluencji i analizę organoidów

· Standardowe 5-pozycyjne płytki pomiarowe zapewniające najwyższą wydajność na rynku

· Niewielkie gabaryty 220x285x240mm

BioApps

Układ graficznego interfejsu użytkownika (GUI) opartego na systemie Android zapewnia prostą i wydajną obsługę.

Można dodawać i modyfikować wiele gotowych i konfigurowalnych BioApps (szablonów testów), dopasowanych do różnych typów komórek, aby spełnić obecne i przyszłe cele badawcze. Korzystanie z BioApp wymaga prostego kliknięcia żądanej BioApp, nazwania próbki, wybrania rozcieńczenia i przeprowadzenia testu, dzięki czemu analiza jest prosta i wygodna.

Projekt graficznego interfejsu użytkownika usprawnia każdy eksperyment i zapewnia natychmiastowy dostęp do uzyskanych obrazów o wysokiej rozdzielczości i wyników.

Algorytmy analizy obrazu

Samouczące się algorytmy analizy obrazu oparte na Al (sztucznej inteligencji) są zdolne do dokładnej identyfikacji i kwantyfikacji małych zagregowanych zawiesin komórek, organoidów i różnorodnych komórek adherentnych. Poza tym Countstar® Mira BF oferuje szeroki zakres funkcji analitycznych, zapewniając możliwość analizy organoidów, sfer komórkowych 3D i innych cząstek o dużych wymiarach 2-180 μm.

Komórki ssacze Grzyby Glony

Zliczanie/żywotność Analiza organoidów Konfluencja

Powiększenie	5,0x	6,6x	8,0x
Optymalny rozmiar	>10 µm	5-10 µm	2-5 µ,
Zlicanie/żywotność	+/+	+/+	+/+
Typowe organizmy	MCF-7 HEK293 Mezenchymalne komórki macierzyste Organoidy jelitowe Sfery komórkowe iPS	Limfocyty T Drożdże browarnicze Embrionalne komórki danio pręgowanego	Chlorella sp. FACHB-8

Prezentacja wyników, przechowywanie wyników i eksport

Intuicyjne oprogramowanie Countstar® Mira BF zapewnia łatwy dostęp do wszystkich uzyskanych obrazów i danych wynikowych. Kilkoma kliknięciami można posegregować wyniki w bibliotece danych Assay (BioApp) według daty i godziny oraz wybrać żądany eksperyment. Wewnętrzna pamięć o pojemności 128 GB umożliwia operatorowi przechowywanie do 50.000 testów.

Poza standardowymi wynikami, takimi jak stężenie komórek, wskaźnik żywotności (śmiertelności), średnica, okrągłość i szybkość aglomeracji, Countstar® Mira BF może określać i wyświetlać stan konfluencji hodowli komórkowej, wskaźnik przylegania komórek, liczbę organoidów, ich rozmiary i przepuszczalność światła. Diagramy generowane w oprogramowaniu wizualizują wyniki eksperymentów. Narzędzia analityczne i obrazy o wysokiej rozdzielczości wizualizują stan wzrostu komórek i rozkład wielkości komórek w celu optymalizacji warunków hodowli komórkowej. System zapewnia możliwość eksportu danych csv i raportów pdf dla każdego eksperymentu.

Menu pokazujące wyniki pojedynczej analizy Histogram średnicy komórek wybranej próbki Porównanie krzywych wzrostu dwóch podobnych eksperymentów hodowlanych

Szybka obsługa

Menu przygotowania eksperymentu: wybierz jeden lub więcej komór płytki pomiarowej, wprowadź odpowiedni identyfikator próbki, zdefiniuj zastosowane rozcieńczenie i kliknij Start - analiza zakończona w mniej niż 20 sekund!

Biblioteka zarządzania materiałami eksploatacyjnymi umożliwia szybki wybór odpowiedniego nośnika próbek dla BioApp. Do tej biblioteki można dodawać nowe materiały eksploatacyjne o innej geometrii i ich wartości warstwy ogniskowania warstwy.

Gotowe protokoły eksperymentów w bibliotece BioApp nie wymagają żadnej interakcji użytkownika podczas analizy. Można kolejno analizować do pięciu komór. Można uzyskać do trzech interesujących obszarów w pojedynczej komorze płytki pomiarowej aby zoptymalizować dokładność i precyzję testów.

Możliwości analizy z różnymi naczyniami

Standardowe płytki pomiarowe Zastosowanie: Analiza organoidów/komórek i zliczanie obiektów oraz analiza żywotności	Płytki Petriego 3.5/6/10cm Zastosowanie: Analiza organoidów i konfluencji	Butelki hodowlane T25 Zastosowanie: Analiza konfluencji


Hemocytometr Zastosowanie: zliczanie komórek i analiza żywotności komórek barwionych błękitem trypanu	8-komorowe µ-płytki Zastosowanie: Analiza organoidów/Badania konfluencji komórek	4-komorowe µ-płytki Zastosowanie: Analiza organoidów/Badania konfluencji komórek

Wszechstronne aplikacje BioApps do różnych typów komórek

BioApp błękit trypanu

Jedną z najczęściej stosowanych metod identyfikacji żywych i martwych komórek ssaków jest klasyczna metoda barwienia błękitem trypanu.

Ze względu na nienaruszoną strukturę błony w żywych komórkach, barwnik Trypan Blue nie będzie mógł wniknąć do cytoplazmy komórki. Natomiast umierające komórki, które tracą aktywność i których membrany ulegają rozpadowi, powodują przepuszczalność barwnika Trypan Blue. Intensywne barwienie wnętrza komórek pozwala na jasne, niezawodne i szybkie rozróżnianie żywych i martwych komórek.

BioApp do zliczanie różnych obiektów

Wybór zoomu optycznego 5,0x, 6,6x i 8,0x w Countstar® Mira BF pozwala operatorowi wykryć i określić ilościowo stężenie zawiesin cząstek o małych rozmiarach (2-8 μm), takie jak glony Chlorella i grzyby Pichia.

Jednocześnie rozpoznawanie obrazu oparte na sztucznej inteligencji umożliwia kwantyfikować i kwalifikować szeroki zakres próbki o nieregularnej morfologii lub nietypowej formie komórek, takie jak pączkujące drożdże Saccharomyces lub sferyczne klastry komórek czy filamenty.

W porównaniu z liczeniem ręcznym, Countstar® Mira BF dokładniej uzyskuje również stężenie i wymiary dużych obiektów, takich jak porowate szklane mikronośniki lub cząstki na bazie polimerów, aby sprostać potrzebą szerokiego grona badaczy.

Sferoidy oparte na iPSC Cząsteczki monodyspersyjne 40 μm Grzyby Pichia

Countstar® Mira BF jest wyposażony w apliakcję BioApp umożliwiającą każdemu użytkownikowi ilościowe określenie organoidów, pochodzących z enzymatycznego wytrawiania próbki tkanek. Używając standardowe płytki pomiarowe Countstar®, można uzyskać 3 do 5 różnych pól widzenia w każdej komorze. Zwiększa to monitorowaną objętość próbki, co skutkuje większą dokładnością danych testowych.

Można zmierzyć takie wskaźniki jak: liczba organoidów, powierzchnia objęta ramką widoku, średni obszar organoidu, średnia średnica komórki, współczynnik kształtu (okrągłość), liczba komórek i całkowita powierzchnia.

W oprogramowaniu można wygenerować histogram rozkładu średnic oraz histogram rozkładu powierzchni dla każdego obrazu. Krzywe wzrostu pomagają w wizualizacji efektów żywienia do określenia idealnego punktu przejścia oraz czas reakcji organoidów na leki.

Małe organoidy myszy (niska gęstość) tuż po wytrawieniu Te same organoidy 2 dni później. Czerwone znaczniki na organoidach, zielone na indywidualnych komórkach

BioApp do organoidów

Szczegółowa analiza ilości i zmian morfologicznych w uprawie organoidów stała się ważnym obszarem badań w rozwoju testów komórkowych, skriningu leków i kontroli jakości hodowli komórkowych.

BioApp przeanalizuje sześć ważnych parametrów: liczba organoidów, średnia powierzchnia, średnia kolistość, średnia transmitancja centralna, rozkład średnic organoidów i zachowanie wzrostu – wszystko to uzyskasz za pomocą obrazowania przez cały okres trwania eksperymentu, aby monitorować wzrost i różnicowanie organoidów.

Pochodzące z komórek macierzystych formowanie 3D Cyst-Bud w modelu mysim

– schemat proliferacji i rozwoju struktury organoidalnej.

W trybie ″Obserwuj i rób zdjęcia″ użytkownik ma możliwość ręcznego wyboru pola widzenia oraz dostosowania warstwy ostrości dna naczynia. Countstar® Mira BF rejestruje obrazy w wybranych obszarach, następnie analizuje te obrazy, aby określić liczbę organoidów w obszarze zainteresowania. Ponadto średnica organoidów, całkowita powierzchnia, środkowa transmitancja skupisk komórek i ich współczynnik kształtu (okrągłość) są analizowane jako specyficzne wskaźniki obserwowanych organoidów.

0 h 24 h 48 h 120 h 168 h
Rozwój organoidów jelitowych myszy, wielokrotnie obserwowany Na 4-komorowej μ-płytce (ibidi) przez Countstar® Mira BF w ciągu 168 h

Widok wyników analizy organoidów. Każdy sklasyfikowany organoid otrzymuje

indywidualny numer, odwołując się do szczegółowej listy wyników w menu.

BioApp do konfluencji

Przykład: Analiza konfluencji komórek HEK293 hodowanych w 10 cm szalkach Petriego.

Próg konfluencji komórek (procent powierzchni pokrytej komórkami w stosunku do możliwej całkowitej powierzchni wzrostu) jest zwykle określany w celu oceny czasu pasażowania komórek. Dokładny czas ma kluczowe znaczenie dla utrzymania fenotypu komórki i jakości hodowli.

Automatyczny analizator komórek Countstar® Mira BF umożliwia analizę konfluencji komórek adherentnych hodowanych na płytkach Petriego i kolbach T25. Wykorzystując innowacyjne algorytmy rozpoznawania obrazu oparte na sztucznej inteligencji (AI), obszar komórek adherentnych i pojedyncze komórki nie adherentne są oznaczane w celu jednoczesnego uzyskania współczynnika konfluencji i przylegania. Ocena proliferacji komórek poprzez generowanie krzywej wzrostu w oprogramowaniu zapewnia nową metodę precyzyjnej i dokładnej oceny różnych linii komórkowych.

Widok wyników analizy konfluencji komórek HEK293, hodowane przez 72 godziny w 10 cm szalce Petriego

Trzydniowe badanie konfluencji komórek HEK293 pokazujące obrazy oryginalne (lewa kolumna) i oznakowane (prawa kolumna). Dodatkowo odpowiedni wykres postępu konfluencji, który można wygenerować bezpośrednio w module DATA oprogramowania Countstar® Mira BF. Wykres przedstawia szybkość duplikacji monowarstwy komórkowej w czasie, dostarczając ilościowych i jakościowych parametrów dotyczących żywotności komórki.